科研和临床检验场所PCR分子实验经常被PCR假阳性问题所困扰,导致这一问题的主要元凶就是核酸气溶胶污染。极微量的核酸气溶胶污染, 即可形成假阳性。一旦形成气溶胶污染,则可引起整个PCR实验室污染,甚至需要关闭实验室。
核酸气溶胶产生的主要途径:(1)核酸提取时,离心机离心/震荡混匀反应液;(2)PCR体系配液时移液器反复吹吸/震荡混匀反应管;(3)PCR扩增完成后开盖;(4)吸打/震荡高浓度质粒。
除气溶胶污染外,RNA酶(RNase)污染也是实验室中令人头痛的事件之一,RNase无处不在,且不容易降解。当科研人员提取RNA时总是着装整齐,手套换了一副又一副,小心再小心,总还是避免不了RNA降解。
万禾生物推出的核酸清除液(Nucleic Acid Scavenger)专门用于PCR实验室高效清除核酸气溶胶污染和RNase污染
将核酸清除液和核酸(RNA、基因组DNA、质粒)在室温下孵育10 min,随后进行琼脂糖凝胶电泳检测,结果显示万禾核酸清除液能有效清除核酸污染。
将核酸清除液与RNase室温孵育10 min,吸净EP管中清除液,再加入总RNA,室温孵育5 min。随后进行琼脂糖凝胶电泳检测,结果显示万禾核酸清除液能有效清除RNase污染。